什么是DNS液体？它有哪些独特之处？

DNS液体

一、

DNS，即3,5二硝基水杨酸，是一种常用的生化试剂，广泛应用于还原糖的测定，其原理是通过在碱性条件下与还原糖发生氧化还原反应，生成棕红色的3氨基5硝基水杨酸，从而通过比色法测定还原糖的含量，DNS液体通常被用于生物化学实验中检测多糖（如纤维素、半纤维素和淀粉等）的水解产物。

二、DNS液体的配制方法

根据不同的文献和标准，DNS液体的配制方法有所不同，以下是几种常见的配制方法：

1. Ghose法

成分：酒石酸钾钠182g，500ml蒸馏水，3,5二硝基水杨酸0.63g，苯酚0.5g，亚硫酸钠2g，无水亚硫酸钠5g。

步骤：

1. 将酒石酸钾钠溶于热溶液中，加入3,5二硝基水杨酸。

2. 在热溶液中依次加入苯酚、亚硫酸钠和无水亚硫酸钠，搅拌均匀至溶解。

3. 冷却后，用蒸馏水定容至100ml，贮存于棕色瓶中，放置710天后使用。

2. 农业部标准法

甲液：结晶苯酚0.69g，9%苯酚溶液90ml，NaOH 2ml。

乙液：酒石酸钾钠255g，NaOH 10g，加重蒸水至450ml。

丙液：四水合酒石酸钾钠91g，重蒸水1000ml。

丁液：无水葡萄糖25g，重蒸水1000ml。

步骤：

1. 将甲液、乙液和丙液混合，加热溶解并冷却后定容至100ml。

2. 将丁液加入上述混合液中，混匀后置于棕色瓶中，放置710天后使用。

3. 轻工业部标准法

甲液：结晶酚0.315g，NaOH 1.315g，酒石酸钾钠9.1g，蒸馏水400ml。

乙液：3,5二硝基水杨酸3.15g，1%的3,5二硝基水杨酸溶液100ml。

步骤：

1. 将甲液和乙液混合，加热溶解并冷却后定容至100ml。

2. 置于棕色瓶中保存，放置710天后使用。

三、DNS液体的配置注意事项

1、配置过程中需注意温度控制，避免高温导致试剂失效或产生沉淀。

2、各成分的添加顺序和时间间隔需严格按照步骤进行，以确保试剂的均一性和稳定性。

3、配置完成后需将试剂贮存于棕色瓶中避光保存，延长其有效期限。

四、DNS液体的应用与检测方法

1. 应用范围

DNS液体主要用于生化试验中物质中还原糖含量的测定，尤其适用于多糖类物质的水解产物分析。

它可用于检测纤维素、半纤维素和淀粉等多糖的水解产物。

2. 检测步骤

制作葡萄糖标准曲线：取干净离心管或试管，按下表进行操作，以检测吸光度值，并以标准葡萄糖浓度为横坐标作图得标准曲线。

还原糖的提取：将提取液或者总糖水解液分别加入DNS试剂，沸水浴中加热5分钟后冷却，再加入蒸馏水定容至一定体积。

测定还原糖含量：分别取制备好的还原糖提取液或者总糖水解液1ml，加入DNS试剂2ml，沸水浴中加热5分钟后冷却，再加入蒸馏水定容至25ml，测定其在540nm处的吸光度值。

五、相关问题与解答

1. DNS液体为什么要用碱性溶液或酒精溶解？

提高灵敏度和准确性：碱性溶液或酒精可以增强DNS液体的渗透性，使其更容易渗透到样品中与还原糖发生反应，从而提高检测的灵敏度和准确性。

避免直接接触：DNS液体中含有硫酸，直接使用可能会对人体健康造成危害，而碱性溶液或酒精可以中和部分硫酸，降低其危害性。

2. DNS液体不添加酒精或者碱性溶液可以吗？

理论上可以：理论上DNS液体可以直接使用，但是不添加酒精或者碱性溶液可能会导致试剂的反应速度变慢，检测的灵敏度和准确性也会受到影响。

建议添加：为了提高检测的准确性和灵敏度，建议在使用DNS液体时添加适量的酒精或碱性溶液。

3. DNS液体如何储存？

避光保存：DNS液体应贮存于棕色瓶中避光保存，以延长其有效期限。

室温条件：一般建议在室温条件下保存，避免低温冻融导致试剂失效。