DNS试剂是什么？

一、产品简介

1、定义：DNS试剂，又称3,5二硝基水杨酸法或简称DNS法，是植物总糖和还原糖检测（硝基水杨酸法）的成分之一，定量检测植物组织样品中的总糖和还原糖的含量。

2、用途：DNS试剂主要用于科研领域，在生化试验中可用于还原糖含量的测定，也可用于生物质中半纤维素含量的测定，它们均需与标准葡萄糖曲线进行比对。

二、配制方法

以下是几种常见的DNS试剂配制方法：

1、农业部标准法：称取3,5二硝基水杨酸3.15g（化学纯），加水500mL，搅拌5秒，水浴至45℃，然后逐步加入100mL 0.2g/mL的氢氧化钠溶液，同时不断搅拌，直到溶液清澈透明，注意加入氢氧化钠过程中，溶液温度不要超过48℃，再逐步加入四水酒石酸钾钠91.0g、苯酚2.50g和无水亚硫酸钠2.50g，继续45℃水浴加热，同时补加水300mL，不断搅拌，直到加入的物质完全溶解，停止加热，冷却至室温后，用水定容至1000mL，用烧结玻璃过滤器过滤，取滤液，储存在棕色瓶中，避光保存，室温下存放7天后可以使用，有效期为6个月。

2、轻工业部标准法：称取3,5二硝基水杨酸（10±0.1）g，置于约600mL水中，逐渐加入氢氧化钠10g，在50℃水浴中搅拌溶解，再依次加入酒石酸甲钠200g、苯酚（重蒸）2g和无水亚硫酸钠5g，待全部溶解并澄清后，冷却至室温，用水定容至1000mL，过滤，贮存于棕色试剂瓶中，于暗处放置710d后使用。

3、Ghose法：甲液将6.9g结晶苯酚溶于15.2mL 10%NaOH溶液，蒸馏水稀释至69mL，在此溶液中加入6.9g亚硫酸氢钠，乙液将255g酒石酸钾钠溶于300mL 10%NaOH溶液中，再加入880mL 1%的3,5二硝基水杨酸溶液，将甲乙二溶液混合即得黄色试剂，储于棕色瓶中放置710d后使用。

三、使用方法

1、将样本DNA溶液与DNS试剂混合，加热至沸，冷却后加入乙醇和醋酸钠溶液。

2、加入新配制的氨基联氨溶液，混匀后静置片刻。

3、加入甲醛溶液，混匀后静置30分钟至1小时。

4、用紫外可见分光光度计测定580nm处的吸光度值，根据标准曲线计算出样本中DNA的浓度。

四、注意事项

1、避免试剂与手接触，因为DNS试剂具有强腐蚀性，如果皮肤接触请立即用大量水冲洗。

2、DNS试剂避免反复冻融，以免失效或效率下降，尽量避光保存。

3、在稀释盐酸和氢氧化钠溶液时，应小心操作，避免伤人。

4、如果待测样本不能及时测定，应置于28℃保存，3天内稳定。

5、如果样品还原糖浓度过高，应用蒸馏水稀释后重测，结果乘以稀释倍数。

6、已取出的试剂不能再放回原试剂瓶内，以防止试剂的再次污染。

五、相关问题与解答

1、DNS试剂可以用于哪些类型的样本？

答：DNS试剂主要用于植物组织样品中的总糖和还原糖检测，但也可以用于其他含有还原糖的样本，如食品、饮料等。

2、DNS试剂的储存条件是什么？

答：DNS试剂应储存在棕色瓶中，避光保存，不同配制方法的DNS试剂有不同的储存条件和有效期，具体请参考相应的配制方法说明。

DNS试剂是一种重要的生物化学试剂，其准确配制和规范使用对于实验结果的准确性至关重要，在使用DNS试剂时，务必遵循相关的操作规程和注意事项，以确保实验的安全和有效性。