一、试剂
1、中文名:3,5二硝基水杨酸试剂,简称DNS试剂。
2、用途:DNS试剂广泛应用于生物化学和分子生物学领域,主要用于定量检测还原糖的含量,在植物组织样品中,它是检测总糖和还原糖的重要工具。
二、试剂成分与配制
1、甲液:将6.9克结晶苯酚溶于15.2毫升10%氢氧化钠溶液中,再用蒸馏水稀释至69毫升,在此溶液中加入6.9克亚硫酸氢钠。
2、乙液:将255克酒石酸钾钠溶于300毫升10%氢氧化钠溶液中,再加入880毫升1%的3,5二硝基水杨酸溶液。
3、混合与储存:将甲乙两种溶液混合即得到黄色的DNS试剂,储于棕色瓶中,放置710天后使用,在棕色瓶内保存一年有效。
三、检测原理
DNS法的检测原理基于还原糖在碱性条件下被氧化成糖酸,同时3,5二硝基水杨酸被还原为棕红色的氨基化合物,这种颜色变化与还原糖的含量成正比,因此可以通过比色法来定量测定还原糖的含量。
四、注意事项
1、在配制DNS试剂时,3,5二硝基水杨酸和氢氧化钠的加入时间一定要相近,或者先加入氢氧化钠,否则会产生难溶的沉淀,导致配制溶液失败。
2、配置过程中,溶液加热温度不宜超过50摄氏度。
3、DNS试剂应储存在棕色瓶中,避免光照和高温,以保持其稳定性。
五、应用领域
DNS试剂在多个领域都有广泛的应用,包括但不限于:
1、食品工业:用于检测食品中的还原糖含量,如糖果、饮料等。
2、农业科研:用于定量检测植物组织样品中的总糖和还原糖含量,为农作物的种植和育种提供科学依据。
3、生物化学研究:作为实验室常规试剂,用于研究生物体内的糖代谢过程。
六、问题与解答
1、问:DNS试剂为什么要用棕色瓶储存?
答:DNS试剂需用棕色瓶储存的原因是为了避免光照对其稳定性的影响,棕色瓶能吸收部分光线,减少光照对试剂的降解作用,从而延长试剂的有效期。
2、问:DNS试剂在使用时有哪些安全注意事项?
答:在使用DNS试剂时,应注意以下几点安全事项:由于试剂中含有氢氧化钠等强碱性物质,操作时应佩戴防护手套和眼镜,避免试剂接触皮肤和眼睛;在进行加热反应时,应控制好温度,避免过热导致溶液飞溅或产生其他危险;使用后的废液应按照实验室规定进行处理,避免对环境造成污染。
DNS试剂是一种重要的生化试剂,在还原糖含量测定中发挥着关键作用,通过正确的配制、储存和使用,可以确保实验结果的准确性和可靠性。
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