DNS试剂的配制步骤
步骤 | 材料与用量 | 操作过程 |
1 | 3,5二硝基水杨酸 (10±0.1) g | 置于约600 mL水中 |
2 | 氢氧化钠 10 g | 逐渐加入,并在50℃水浴中搅拌溶解 |
3 | 酒石酸甲钠 200 g | 依次加入并搅拌至溶解 |
4 | 苯酚 (重蒸) 2 g | 加入并搅拌至溶解 |
5 | 无水亚硫酸钠 5 g | 加入并搅拌至全部物质溶解澄清 |
6 | 定容 | 冷却至室温后,用水定容至1000 mL,并进行过滤 |
材料作用解析
3,5二硝基水杨酸:作为DNS试剂的主要成分,用于与还原糖发生显色反应。
氢氧化钠:提供碱性环境,促进还原糖与3,5二硝基水杨酸的反应。
酒石酸甲钠:增加溶液的溶解性和稳定性。
苯酚:增加反应的灵敏度。
无水亚硫酸钠:防止试剂中的其他成分氧化。
注意事项
确保所有化学品纯度足够高,避免杂质影响实验结果。
在加热和搅拌过程中使用磁力搅拌器保持均匀,避免局部高温或不均匀。
定容后的DNS试剂应存放在棕色瓶中,避光保存以延长使用期。
相关问题与解答
Q1: 如果在配制DNS试剂时难以溶解怎么办?
A1: 确保使用的水浴温度为50℃,并采用磁力搅拌器持续搅拌,若溶解仍有困难,可以适当增加水浴的温度,但不要超过60℃以避免化学反应的发生,同时检查化学品的质量和新鲜度,确保没有过期或受潮。
Q2: DNS试剂配制完成后如何确认其可用性?
A2: 可以通过测试一个已知浓度的还原糖标准溶液来验证DNS试剂的活性,将DNS试剂与标准还原糖溶液混合反应,通过比色法测定吸光值的变化来评估DNS试剂是否正常工作,如果结果显示颜色变化符合预期,则说明DNS试剂是有效的。
通过上述步骤和注意事项,可以成功配制出质量可靠的DNS试剂,为还原糖含量的测定提供准确的化学试剂支持。
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