如何正确配制DNS溶液以测定还原糖含量?

DNS溶液是生物化学和微生物学实验室中用于测定还原糖含量的常用化学试剂。其配制步骤详细如下:

一、实验材料

1、3,5二硝基水杨酸:6克(具体用量根据实验需求调整)

2、酒石酸钾钠:182克

3、苯酚:5克

4、亚硫酸氢钠:2.5克

5、氢氧化钠:20克

6、蒸馏水:适量

二、实验步骤

1、准备溶液A:将6克结晶苯酚溶于15.2毫升10%的氢氧化钠溶液中,再用蒸馏水稀释至69毫升,在此溶液中加入6.9克亚硫酸氢钠。

2、准备溶液B:将182克酒石酸钾钠溶于300毫升10%的氢氧化钠溶液中,再加入880毫升1%的3,5二硝基水杨酸溶液。

3、混合溶液:将溶液A与溶液B混合,得到黄色试剂,贮于棕色瓶中,避光保存7天后使用。

4、注意事项:在配制过程中,加热温度不宜超过50摄氏度,以防止生成难溶沉淀,由于3,5二硝基水杨酸与氢氧化钠的加入时间必须非常接近,否则会产生难溶沉淀,影响实验结果。

三、不同配方示例

除了上述标准配方外,还有一些不同的DNS试剂配方可供选择,如轻工业部标准、农业部标准等,这些配方在成分比例上有所不同,但基本原理和操作步骤相似,农业部标准配方中,3,5二硝基水杨酸的用量为3.15克,氢氧化钠的用量为21克,酒石酸钾钠的用量为182克,苯酚的用量为5克,亚硫酸氢钠的用量为2.5克。

四、问题与解答

1、问题一:DNS溶液配制时为什么要使用棕色瓶储存?

解答:DNS溶液对光敏感,容易在光照下分解失效,使用棕色瓶储存可以有效避免光线照射,延长溶液的使用寿命。

2、问题二:DNS溶液在配制过程中出现沉淀怎么办?

解答:如果在配制过程中出现沉淀,可能是由于3,5二硝基水杨酸与氢氧化钠的加入时间相隔过长或加热温度过高导致的,此时应重新配制溶液,并严格控制加入时间和加热温度。

3、问题三:DNS溶液可以重复使用吗?

解答:DNS溶液通常不建议重复使用,因为在使用过程中,溶液中的有效成分会逐渐消耗,同时可能会受到污染或降解,影响测定结果的准确性,建议每次实验都使用新鲜配制的DNS溶液。

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